ELISA酶联免疫吸附
ELISA技术是一种基于固相载体的酶标记免疫检测方法,其流程包括将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,然后用酶标记的抗原或抗体进行识别,反应在固相载体表面进行。此方法可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有许多优点,包括快速、灵敏、简单、易于标准化等。这种检测技术已被广泛应用于生物学、医学、农业等许多领域,成为许多研究的有力工具。
技术原理
该技术利用抗原与抗体之间的特异性反应来将待测物与酶连接,然后通过酶与底物之间的反应产生颜色变化,从而实现定量测定。测定的对象可以是抗体或抗原。 在这种测定方法中,有三种关键试剂: 固相免疫吸附剂,即固定在载体上的抗原或抗体; 酶标记物,即与抗原或抗体结合并标记上酶的物质; 显色剂,即能够与酶作用并产生颜色反应的底物。 在测量过程中,抗原(或抗体)首先结合在固相载体上,但仍然保留其免疫活性。然后,加入与酶结合的抗体(或抗原)形成偶联物(即标记物),该偶联物仍然保留其免疫活性和酶活性。当偶联物与固相载体上的抗原(或抗体)发生反应结合后,再加入相应的酶底物,就会触发催化水解或氧化还原反应并出现颜色变化。产生的颜色的深浅与所测抗原(或抗体)的含量成正比。这种有色产物可以用肉眼、光学显微镜或电子显微镜观察,也可以使用酶标仪(即分光光度计)进行测定。该方法简单方便、迅速,并且具有高度特异性。
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