免疫组化与免疫荧光实验培训
用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)或免疫细胞化学(immunocytochemistry)。
样品准备
石蜡切片
- 4%多聚甲醛固定
- 切片65℃化蜡
- 二甲苯脱蜡
- 梯度酒精复水
冰冻切片
- OCT包埋切片
- 切片室温复温
- PBS洗涤
细胞爬片
- 贴壁爬片,悬浮涂抹
- 4%多聚甲醛固定
- PBS洗涤
SP法免疫组化实验步骤
- PBS洗涤三次
- 抗原修复
- 阻断过氧化氢酶
- PBS洗涤三次
- 山羊血清封闭
- 一抗4℃过夜孵育
- 生物素二抗
- SP反应
- DAB显色
- 苏木素染核
- 梯度酒精脱水,二甲苯
- 封片
免疫荧光实验步骤
- 破膜
- PBS洗涤三次
- 山羊血清封闭
- 一抗4℃过夜孵育
- 二抗标记
- PBS洗涤三次
- 染核
- PBS洗涤三次
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